多模式照明平台用于整个哺乳动物细胞的3D单分子超分辨率成像
Tyler Nelson1,2,3, Sofía Vargas-Hernández1,4,5, Margareth Freire1
1Department of Chemistry, Rice University, 6100 Main St, Houston, TX 77005, USA.
Biomedical optics express
|June 10, 2024
概括
一个新的多式照明平台可以在厚的哺乳动物细胞中进行精确的3D纳米级成像. 这种多功能系统优化了各种细胞结构的信号与背景比率 (SBR),提高了超分辨率显微镜数据质量.
科学领域:
- 生物物理学的生物物理.
- 光学显微镜的使用方法
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 单分子超分辨率成像需要最佳的信号与背景比率 (SBR),以精确地在厚型哺乳动物细胞中进行3D定位.
- 现有的方法在优化SBR以适应多种细胞结构时往往缺乏多功能性.
研究的目的:
- 开发一个多功能多式照明平台,用于3D单分子超分辨率成像.
- 为了实现针对特定目标的SBR优化,以加强细胞架构的纳米级研究.
主要方法:
- 光板 (LS),后照明和全内部反射光 (TIRF) 照明方案的整合.
- 采用商用零件,为一个多功能和可切换的光学平台.
- 为改进3D本地化而进行点传播函数 (PSF) 工程.
主要成果:
- 展示了一种多模式平台,可以在整个哺乳动物细胞中进行3D单分子超分辨率成像.
- 平面场TIRF照明改善了覆盖滑动相邻结构的数据质量,具有低背景和均动力学.
- LS照明为整个细胞的成像结构提供了增加的对比度.
结论:
- 开发的平台通过优化SBR用于不同细胞点来促进精确的3D纳米级研究.
- 这种多功能显微镜方法增强了用于细胞架构调查的超高分辨率成像能力.
- 在人类骨髓瘤细胞中用于焦点粘附复合体和actin的双色图像验证.
