细胞不透的缓冲化探针用于活细胞超分辨率成像等离子体膜形态动力学动态

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物物理学的生物物理.
• 显微镜的使用方法

背景情况:

• 超高分辨率光成像为等离子体膜 (PM) 结构和功能提供纳米尺度的洞察力.
• 探针光稳定性和细胞内化的局限性阻碍了动态PM过程的超分辨率成像.

研究的目的:

• 开发新的化探针,用于增强的超分辨率成像等离子体膜.
• 研究等离子体膜动力学,包括细胞外囊泡的形成和融合.

主要方法:

• 通过组装介导的缓冲化探针 (BMP-14和BMP-16) 进行了合成和表征.
• 使用结构化照明显微镜 (SIM) 可视化PM动态.
• 使用了单分子光成像技术 (例如,PAINT).

主要成果:

• BMP-14和BMP-16显示了快速的PM标记和长时间的保留 (>2小时).
• 这些探测器通过快速取代光漂白的光体,使得稳定,长期的超高分辨率成像成为可能.
• 观察到PM filopodia运动的动态过程,细胞外囊泡 (EV) 的形成,以及不同的EV融合模式.
• BMP-16显示单分子光闪,适合用于PAINT成像.

结论:

• 开发的PM缓冲探头克服了超分辨率显微镜光稳定性和标记方面的局限性.
• 获得了对等离子膜EV形成和融合机制的新见解.
• BMP-16为高级细胞膜成像技术 (如PAINT) 提供了独特的功能.