使用酸沉和LC-MS/MS,对11种治疗抗体进行高吞吐量,低成本的定量化

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 药理学 药理学是指药理学的学科.

背景情况:

• 治疗性抗体的治疗药物监测 (TDM) 面临着挑战,因为不同的量化方法阻碍了结果的可比性.
• 液态色谱-质谱法 (LC-MS) 方法提供了更好的可比性,但通常被认为是复杂和昂贵的.

研究的目的:

• 开发一种简化,具有成本效益的LC-MS/MS方法,用于同时量化人类血清中的11种治疗性单克隆抗体 (t-mAbs).
• 为了提高t-mAbs在研究和临床环境中的稳定性,速度,并降低TDM的复杂性.

主要方法:

• 一个单步净化,使用酸沉,然后进行蛋白质溶解.
• 使用Infliximab作为样品制备标准和同位素标记进行正常化的LC-MS/MS分析.
• 根据公认的指导方针进行验证,在众多患者样本中进行矩阵效应和干扰化合物分析.

主要成果:

• 在一次运行中同时定量11t-mAbs,平均精度为5.1%,在4-256μg/ml范围内准确度为96.3%.
• 经过证明的稳定性和减少复杂性,适合自动化液体处理.
• 描述了第一个LC-MS协议,用于基于特征的杜尔瓦卢马布量化.

结论:

• 开发的方法为t-mAb量化提供了一种综合方法,以提高稳定性,速度和降低复杂性.
• 这种方法可以促进在研究项目和临床环境中统一应用.
• 高通量方法可以适应各种药物小组.