基于MSC衍生的EV制剂的跨实验室多重珠子表面蛋白质分析识别了MSC-EV表面标记符号的签名

科学领域:

• 再生医学是一种再生医学.
• 细胞外囊泡生物学 细胞外囊泡生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 介质细胞 stromal 细胞 (MSCs) 在再生医学中得到利用,它们的治疗作用在很大程度上是由分泌的细胞外囊泡 (EVs) 介导的.
• 从MSC衍生的EV (MSC-EV) 与细胞疗法相比具有优势,但由于不同的制造和表征方法,它们具有显著的产品多样性.
• 缺乏标准化表征阻碍了可靠的实验室间比较和MSC-EV疗法的临床翻译.

研究的目的:

• 建立一个共同的,标准化的方法来表征MSC-EV制剂,以促进实验室间的比较.
• 确定一个一致的表面标记面板,以可靠地识别MSC衍生的电动汽车.
• 评估制造和培养条件对MSC-EV表面标记物配置文件的影响.

主要方法:

• 开发并验证了一种基于多重珠的新型EV流细胞计试验面板.
• 进行了实验室间评估,涉及来自五个不同实验室的11种MSC-EV产品.
• 分析了MSC-EV制剂的一系列细胞表面标记物,包括已建立的MSC标记物和其他相关蛋白质.

主要成果:

• 在所有测试的MSC-EV制剂中发现了一组一致的阳性表面标记物 (CD44,CD73,CD105) 和负标记物 (CD11b,CD45,CD197).
• 层次聚类揭示了与特定的制备过程和实验室条件相关的独特的表面标记者配置文件.
• 发现培养基成分,如人类血小板溶解酸,会影响EV表面标记物表达.

结论:

• 拟议的标准化流量细胞计方法可以对MSC-EV表面标记物进行可靠的特性鉴定,用于质量控制.
• 建议CD73,CD105和CD44作为可靠的阳性标记物,而CD11b,CD14,CD19,CD45和CD79作为MSC-EV识别的可靠负性标记物.
• 这种标准化对于提高治疗性MSC-EVs新兴领域的一致性,可重复性和质量控制至关重要.