翻译后修改的和蛋白质的基于快速流的合成:MYC的交换活化域的案例研究
Elyse T Williams1, Kevin Schiefelbein1, Matthias Schuster1
1Department of Chemistry, University of Zurich Winterthurerstrasse 190 8057 Zurich Switzerland nina.hartrampf@chem.uzh.ch.
Chemical science
|June 14, 2024
概括
研究人员开发了基于快速流的方法来合成具有多个翻译后修饰 (PTM) 的修饰c-Myc (MYC) 蛋白质. 这使得MYC的有效研究成为可能.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分子生物学分子生物学
- 化学合成 化学合成
背景情况:
- c-Myc (MYC) 的蛋白与蛋白相互作用至关重要,并且通常由翻译后修饰 (PTM) 调节.
- 使用传统的重组方法,获得具有特定PTM模式的MYC蛋白质对于研究来说是具有挑战性的.
- 现有的合成技术耗时且仅限于研究单个PTM.
研究的目的:
- 开发基于流的快速方法,用于合成多样化和多个PTM的MYC序列.
- 为了能够系统地调查MYC蛋白相互作用中的PTM功能.
- 为了促进对MYC构造进行有约束力的研究的快速选.
主要方法:
- 为化MYC序列 (高达84AA) 开发基于流的合成.
- 包括各种PTM在内,包括Nε-甲基化,硫化,乙化和糖化.
- 的生产和净化最多有七个PTM和五个酸化位点.
- 异质核核核磁共振和原生质谱的应用,用于结合试验.
主要成果:
- 成功快速合成高达84个氨基酸的化MYC序列.
- 在高产量和纯度下,在五个地点制备多达七种不同的PTM和酸化的.
- 十个PTM装饰的MYC交易域 (TAD) 类型的特征.
- 确定酸化和糖化对MYC:Bin1相互作用强度的影响.
结论:
- 开发的基于流程的平台能够快速合成具有复杂PTM模式的MYC序列.
- 这种方法有助于在分子水平上对PTM功能进行系统研究.
- 该方法提供了一个方便的工具,可以快速选蛋白质结构和PTM对相互作用的影响.
