基于CRISPR/Cas9的工程Escherichia coli生物传感器用于在饮用水中敏感和特定检测Cd(II)
Yijun Wei1, Danyang Shi1, Tianjiao Chen1
1Military Medical Sciences Academy, Academy of Military Sciences, China.
Chemosphere
|June 14, 2024
概括
开发了一种全细胞生物传感器,K12-PMP-luxCDABE-△cysI,用于饮用水中敏感和特定检测 (Cd(II)). 这种工程化的大肠杆菌菌株提供了增强的光,并避免了其他金属离子的干扰.
科学领域:
- 环境科学 环境科学
- 生物技术是生物技术.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- (Cd) 是一种广泛存在的环境污染物,对人类健康有重大风险.
- 准确监测饮用水中的 (Cd) 对于保护公众健康至关重要.
- 目前用于Cd (II) 检测的细菌生物传感器遭受弱信号和来自其他物质的干扰.
研究的目的:
- 开发一种高度敏感和特定的全细胞生物传感器,用于在水中检测Cd.
- 设计一种能够在低度下可靠检测Cd (II) 的大肠杆菌菌株.
主要方法:
- 在大肠杆菌中使用CRISPR/Cas9基因编辑构建了一个稳定的全细胞生物传感器,K12-PMP-luxCDABE-△cysI.
- 整合了一个双促进体系统 (Pmer和merR(m)) 与光酶基因 (luxCDABE).
- 通过敲除抗基因cysI.I.的增强Cd(II) 敏感性.
主要成果:
- 该K12-PMP-luxCDABE-△cysI生物传感器显示了0.0052 mg/L的Cd的检测范围.
- 与其他工程菌株相比,实现了优越的光强度,满足饮用水限制.
- 对Cd(II) 呈现出高特异性,没有Zn(II),Hg(II或Pb(II) 的干扰.
- 在高稳定性 (RSD <5%) 的真实饮用水样本中表现出色.
结论:
- 工程化大肠杆菌生物传感器K12-PMP-luxCDABE-△cysI是敏感和特定Cd (II) 检测的一个有希望的工具.
- 这种生物传感器克服了以前方法的局限性,在复杂的样本中提供可靠的监测.
- 开发的菌株为环境水质评估提供了稳定有效的平台.
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