开发和评估一种液态色谱-并联质谱法,用于同时测量来自大脑组织的有毒化物
Yuanyuan Ji1, Yulemni Morel1, Anh Q Tran1
1Department of Pharmaceutical Sciences, University of Maryland School of Pharmacy, Baltimore, MD 21201, USA.
概括
一种新的LC-MS/MS方法准确地量化了大脑组织中的反应性化物. 这种方法揭示了创伤性脑损伤后显著的化物积累,有助于了解疾病进展.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 神经科学是一个神经科学.
- 分析化学 分析化学
背景情况:
- 反应性化物在生理过程和脂质过氧化中至关重要.
- 这些化物与心血管和神经退行性疾病有关.
- 精确量化大脑组织中的多重反应性化物是具有挑战性的.
研究的目的:
- 开发和验证一种敏感的LC-MS/MS方法,用于量化大脑组织中的四种关键反应性化物.
- 比较衍生试剂以提高检测灵敏度.
- 将验证的方法应用于创伤性脑损伤模型.
主要方法:
- 使用了3 - 尼托菲尼尔化衍生物结合LC-MS/MS.
- 为了敏感性,比较了3 - - 尼托菲尼尔氨酸与2,4 - - 尼托菲尼尔氨酸.
- 优化的水解,蛋白质沉 (20% TCA) 和衍生条件 (25mM试剂,20°C,30分钟).
- 减少矩阵效应和离子抑制以实现高效的分析 (运行时间<7分钟).
主要成果:
- 与2,4-dinitrophenylhydrazine相比,3-nitrophenylhydrazine表现出更高的敏感性.
- 在优化条件下,通过使用稳定标记的内部标准,精确量化了马隆迪甲基,阿克罗林,4-基-2-基和4-基-2-非基.
- 在创伤后的28天内,在小鼠中观察到大量的阿克罗莱因,4-基-2-基和4-基-2-非基的积累.
结论:
- 建立了一种经过验证的,快速的LC-MS/MS方法,用于脑组织中反应性化物量化.
- 该方法可以准确测量关键的脂质过氧化标志物.
- 这种测试对于研究急性脑创伤和相关疾病中的反应性化物动态有价值.
