针对SARS-CoV-2的病毒样粒子伪型病毒中和试验的优化和验证

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 免疫学 免疫学 免疫学
• 疫苗学 疫苗学 疫苗学

背景情况:

• 基于尖端蛋白的伪型病毒在评估所有SARS-CoV-2结构蛋白 (S,E,M,N) 时是有限的.
• 第一代病毒样粒子 (VLP) 伪型病毒的标位很低,特别是像Omicron这样的变体,阻碍了中和抗体检测.
• 现有的方法难以准确评估针对多样化和不断演变的SARS-CoV-2菌株的中和抗体反应.

研究的目的:

• 为可靠的SARS-CoV-2中和试验开发一个优化的VLP伪型病毒系统.
• 增强VLP伪型病毒标位和稳定性,用于检测针对各种SARS-CoV-2菌株的抗体,包括Omicron.
• 建立一个强大的,高通量测定用于中和抗体的临床血清分析.

主要方法:

• 优化尖尖糖蛋白信号和用SARS-CoV-1替换M和E蛋白质.
• 具有特定突变 (P199L,S202R,R203M) 和截断的包装信号 (PS9) 的工程核体 (N) 蛋白.
• 优化中和试验参数 (细胞类型,细胞数,病毒注射剂) 并使用真实病毒进行验证.

主要成果:

• 实现了野生型VLP伪型病毒标位的100倍以上的增加,并成功包装了Omicron VLP伪型病毒.
• 经过10个冷解周期的稳定标位和在试验内 (11.5%) 和试验间 (11.1%) 的最小变化.
• 在VLP伪型病毒和真实病毒中和试验之间显示出强烈的相关性 (r=0.9).

结论:

• 开发了一种可靠和高滴度的SARS-CoV-2 VLP伪型病毒中和试验.
• 该试验适用于在临床环境中对各种SARS-CoV-2突变菌株中和抗体的高通量检测.
• 该平台为评估疫苗有效性和治疗抗体对SARS-CoV-2的反应提供了宝贵的工具.