通过流式细胞计量检查热的检查
1National Key Laboratory of Veterinary Public Health Security; Animal Epidemiology of the Ministry of Agriculture; College of Veterinary Medicine, China Agricultural University.
Journal of visualized experiments : JoVE
|June 17, 2024
概括
炎症性细胞死亡的 Pyroptosis 现在可以使用流细胞计量量化. 这种方法检测到感染性病病毒感染的细胞中的气皮质E N-终端 (chGSDME-NT),区分热与其他类型的细胞死亡.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 病毒学 病毒学
背景情况:
- 热死是一种被编程的细胞死亡,涉及由Gasdermin (GSDM) N-termini形成等离子体膜孔隙.
- GSDM-NT的西方斑点是常见的,但很难区分热死与其他细胞死亡形式.
研究的目的:
- 开发和验证一种流细胞计法,用于定量型细胞.
- 为了评估感染性突发性疾病病毒 (IBDV) 感染的DF-1细胞中的 pyroptosis.
主要方法:
- 使用流细胞计与针对GSDME N-terminus (chGSDME-NT) 和化 (PI) 染色的特定抗体.
- 采用IBDV感染的DF-1细胞作为模型系统.
- 使用Alexa Fluor 647标记的抗体检测到与膜结合的chGSDME-NT.
主要成果:
- chGSDME-NT阳性细胞可以通过流细胞计轻松检测.
- 显著更高比例的chGSDME-NT/PI双阳性细胞 (约. 33%) 在IBDV感染细胞中与对照细胞相比观察到 (P < 0.001).
结论:
- 膜结合的chGSDME-NT的流细胞计分析是识别热细胞的有效方法.
- 这种技术提供了一种比西方血栓测试更精确的方法来量化热.
