评估商业循环介导的同热放大主混合物,以加强对食品传播病原体的检测

科学领域:

• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.
• 核酸扩大核酸扩大

背景情况:

• 循环介导同热放大 (LAMP) 是一种广泛采用的核酸放大方法.
• 有越来越多的商业,准备好使用的LAMP总组合可用.
• 这些商业LAMP总组合的独立性能评估很少.

研究的目的:

• 对五个商业LAMP总组合进行独立评估.
• 根据放大速度,DNA度灵敏度和反应添加剂的影响来比较它们的性能.
• 提供数据,以帮助科学家选择合适的LAMP试剂.

主要方法:

• 经过评估的WarmStart® LAMP套件,LavaLAMPTM DNA大师混合,Saphir Bst Turbo GreenMaster,OptiGene快速大师混合 ISO-004,以及SynLAMP混合. 这两种混合物都在使用中.
• 针对三个不同的基因:ttr (沙门氏菌spp. ),rfbE (E.E.>),rfbE (E.E.>),rfbE),rfbE (E.E.>),rfbE (E.E.>),rfbE),RfbE (E.E.>),RfbE),RfbE (E.E.>),RfbE),RfbE (E.E.>),RfbE),RfbE (E.E.>) 的意思就是说 大肠杆菌 (O157) 和hly (Listeria monocytogenes) 等.
• 评估了放大速度,对DNA的连续稀释的性能,以及贝他因,DMSO,pullulan,TMAC和GuHCl的影响.

主要成果:

• 在评估的主组合中观察到显著的性能差异.
• OptiGene Fast Master Mix表现出最快的放大,并显示出对反应添加剂的弹性.
• 普鲁兰被确定为改善测试混合物的放大速度最有效的添加剂.

结论:

• 商用LAMP主混合物显示可变的性能特征.
• 试剂的选择和添加剂的使用,如pullulan可以显著影响LAMP测定效率.
• 这项研究提供了关键的比较数据,以指导选择用于分子诊断和研究的商业LAMP主混合物.