开发细胞外囊泡 (EV) 的采样和储存协议-为多创伤患者建立第一个EV生物库
Birte Weber1, Aileen Ritter1, Jiaoyan Han1
1Department of Trauma-, Hand- and Reconstructive Surgery, University Hospital Frankfurt, Goethe University, 60486 Frankfurt am Main, Germany.
International journal of molecular sciences
|June 19, 2024
概括
建立细胞外囊泡 (EV) 的生物库对于多创伤研究至关重要. 尺寸排除色谱 (SEC) 是最适合生物银行使用的EV隔离方法,可从血和血清中保存EV数量.
科学领域:
- 生物医学研究的研究.
- 细胞外囊泡 (EV) 研究研究
- 生物银行的协议.
背景情况:
- 细胞外囊泡 (EVs) 在多创伤中显示出作为损伤特异性生物标志物的潜力.
- 创伤研究网络 (NTF) 生物库旨在扩大对多创伤患者的EV研究.
- 目前缺乏用于生物银行的EV隔离,表征和存储的标准化协议.
研究的目的:
- 为了比较EV隔离方法的生物银行适用性.
- 评估储存条件和样品处理对电动汽车完整性的影响.
- 建立一个EV生物库的最佳协议.
主要方法:
- 超离心,尺寸排除色谱 (SEC) 和基于免疫磁珠的隔离方法的比较.
- 使用纳米粒子跟踪分析,蛋白质和miRNA水平量化EVs.
- 在各种存储条件下 (温度,冷-解周期) 评估EV稳定性和隔离解决方案.
主要成果:
- 尺寸排除色谱 (SEC) 成为EV生物银行最合适的方法.
- 血和血清样本之间没有观察到EV数量的显著差异.
- 无颗粒PBS被证实是最佳的隔离溶液;长期冷血是一种可行的EV来源.
- 连续的冷解周期影响了EV大小,但不影响数量;短时间的干冰储存降低了蛋白质度.
结论:
- 建议在生物银行设置中将SEC用于EV隔离.
- 标准化协议对于保持电动汽车的完整性和研究有效性至关重要.
- 通过优化方法,从多创伤患者样本的EV生物库是可行的.
