定量蛋白质学揭示了细胞对单个mAb表达和CHO细胞中尼卡米辛的细胞反应

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 蛋白质组学是指蛋白质组学.

背景情况:

• 中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞对于生物制药行业的抗体生产至关重要.
• 了解CHO细胞的分子组成是提高抗体生产能力的关键.
• 蛋白质组和基因组分析为生物处理,生产力和产品质量提供了洞察力.

研究的目的:

• 为了比较分析高和低抗体产生的CHO细胞系的蛋白质组概况.
• 为了研究图尼卡米辛 (TM) 诱导的内质网膜 (ER) 应激对CHO细胞的影响.
• 在不同的生产水平下,识别参与未折叠蛋白反应 (UPR) 的蛋白质和途径.

主要方法:

• 无标签量化用于比较性蛋白质基因分析.
• 在高抗体生产CHO细胞系与低抗体生产CHO细胞系中分析蛋白质表达.
• 在温和的图尼卡米辛 (TM) 治疗中评估蛋白质表达的变化,以诱导ER压力.

主要成果:

• 在低生产者与高生产者细胞系中参与蛋白质折叠的蛋白质的升级,表明ER压力.
• 确定HSpa9和Dnaja3作为关键的线粒体UPR激活蛋白质.
• 在响应TM治疗时,Nedd8和Lgmn的显著上调,Hspa5/Bip和Pdia4的下调,表明UPR激活发生了改变.

结论:

• 在高抗体和低抗体产生CHO细胞系之间存在着不同的蛋白质结构.
• 轻微的ER压力会影响UPR通路,并确定了特定的蛋白质候选物.
• 这些发现为更好的生物制药生产提供了对CHO细胞生物学的更深入的理解.