通过使用不同方法从长期存储的血样本中分离的细胞外囊的蛋白质组概况进行比较
Ana Torres1,2, Lorena Bernardo1,2, Carmen Sánchez1,2
1WHO Collaborating Centre for Leishmaniasis, Spanish National Centre for Microbiology, Instituto de Salud Carlos III, Majadahonda, Spain.
Biological procedures online
|June 19, 2024
概括
结合大小排除色谱和超离心法 (SEC+UC),可以从储存的血中提高细胞外囊泡 (EV) 的纯度. 这种改进的EV隔离方法可以进行全面的蛋白质组分析,以发现新的生物标志物.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 生物技术是生物技术.
- 蛋白质组学是指蛋白质组学.
背景情况:
- 缺乏标准化的细胞外囊泡 (EV) 隔离协议,特别是生物银行存储的血.
- 这限制了用于临床应用的新型EV生物标志物的发现和研究.
研究的目的:
- 评估一种结合的SEC+UC方法,用于从储存的血中分离高纯度的EV.
- 评估SEC+UC隔离EV的适用性,以进行全面的蛋白质组分析和生物标志物发现.
主要方法:
- 从人体血中分离出EV,使用超离心法 (UC),大小排除色谱法 (SEC) 或组合SEC+UC方法.
- 电子电路的表征涉及传输电子显微镜,纳米粒子跟踪分析,西部涂抹和蛋白质组分析.
主要成果:
- 与单独的UC或SEC相比,SEC+UC方法产生了具有更高纯度和更复杂蛋白质的EV.
- 在SEC+UC分离物中,西部涂抹表明血蛋白污染 (白蛋白) 降低.
- 对SEC+UC分离物的蛋白质组分析确定了181种独特的蛋白质,包括低丰度的血蛋白质,适合生物标志物发现.
结论:
- SEC+UC隔离策略提供了从生物银行存储的血中获得的高度纯净和多样化的电动汽车.
- 这种方法适用于深入的蛋白质组分析,有助于识别用于诊断和个性化医学的新生物标志物.
