使用化学同位素衍生策略与LC-MS/MS相结合的肠道微生物群代谢物的量化:在新生儿缺氧缺血性脑病变的老鼠模型中应用

科学领域:

• 代谢学 代谢学 代谢学
• 分析化学 分析化学
• 微生物组研究 微生物组研究

背景情况:

• 肠道微生物组的代谢物,包括SCFA,BA和TRP衍生物,对健康和疾病至关重要.
• 鉴定这些代谢物的数量是具有挑战性的,因为它们的丰度很低,结构相似,以及检测限制.
• 准确的量化对于理解它们的生理和病理作用至关重要.

研究的目的:

• 开发一种高度敏感和精确的LC-MS/MS方法来量化肠道微生物群衍生代谢物.
• 与传统方法相比,提高代谢物检测灵敏度.
• 将开发的方法应用于新生儿缺氧性缺血性脑病变 (HIE) 的老鼠模型.

主要方法:

• 开发了一种液体色谱-并联质谱法 (LC-MS/MS) 方法.
• 使用化学同位素衍生技术与4- ((氨基甲基) -N,N-二甲基氨-d0/d6 (4-AND-d0/d6) 试剂.
• 在血,大脑和便样本中量化了37种典型的肠道微生物组衍生代谢物.

主要成果:

• 与非衍生分子相比,在代谢物检测方面获得了1500倍的灵敏度增强.
• 证明了与稳定同位素标记内部标准 (SIL-IS) 方法相比的定量准确性.
• 在新生儿HIE大鼠模型中成功应用了该方法来识别关键代谢物.

结论:

• 开发的LC-MS/MS方法为量化肠道微生物群代谢物提供了一种敏感和可靠的方法.
• 这种技术显著提高了研究代谢物在疾病发病过程中的作用的能力.
• 该方法为研究肠道微生物群对HIE等疾病的影响提供了有价值的工具.