一种用于快速可靠量化VEGF细胞结合活性的方法
Prabuddha Waduge1, Avinash Kaur1, Wei Li1
1Cullen Eye Institute, Department of Ophthalmology, Baylor College of Medicine, Houston, TX, 77030, USA.
Biochemical and biophysical research communications
|July 2, 2024
概括
我们开发了一种T7菌体显示方法,以量化人类血管内皮生长因子 (VEGF) 异形对细胞的结合. 在检测VEGF细胞相互作用方面,hVEGF206异型表现出最高的灵敏度.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 分子生物学分子生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 血管内皮生长因子 (VEGF) 对血管生成,细胞生长和生存至关重要.
- 量化VEGF-细胞结合是具有挑战性的,因为可逆的配体-受体相互作用.
研究的目的:
- 使用T7菌体显示器量化和比较三种人类VEGF-A (hVEGF) 异型的细胞结合活性.
- 为了评估T7菌体显示的实用性,以快速量化连体细胞结合.
主要方法:
- 使用T7菌体显示器生成和呈现hVEGF111,hVEGF165和hVEGF206异型.
- 评估了菌体显示异型体与固定化的阿弗利伯塞普特,肝素硫酸盐和各种细胞类型 (HUVECs,HEK293,SK-N-AS) 的结合.
主要成果:
- 所有hVEGF异型均与aflibercept结合.
- hVEGF206-Phage对细胞和硫酸肝素的结合程度最高,而hVEGF111-Phage对细胞的结合程度最低.
- 尽管对SK-N-AS细胞的背景结合较高,但hVEGF206-Phage对VEGF细胞结合检测的灵敏度最高.
结论:
- 通过T7菌体显示呈现的hVEGF206异型是量化VEGF-细胞结合的最佳方法,具有卓越的灵敏度.
- T7菌体显示器提供了一个多功能平台,可以快速方便地量化连体细胞结合活动.
