哺乳动物细胞显示器具有自动化的oligo设计和图书馆组装,可以快速地绘制残留水平构造性表位图

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.
• 结构生物学 结构生物学

背景情况:

• 对抗体机制的理解,预测治疗反应和设计疫苗至关重要.
• 传统的方法,如X射线晶体学,用于不连续的表位图谱绘制,是耗时和劳动密集的.
• 需要更快,更有效的方法来确定表位,特别是对于新出现的传染病.

研究的目的:

• 开发和验证一种快速的组合方法,用于使用哺乳动物抗原显示进行不连续的表位图绘制.
• 消除在表位组确定中对蛋白质表达和净化的要求.
• 能够更快地开发治疗性抗体和针对新型病原体的疫苗.

主要方法:

• 开发了一种组合哺乳动物抗原显示系统,利用自动化工作流程和定制软件.
• 通过寡核酸介导的突变发生被用来创建在哺乳动物细胞上显示的抗原受体变异的库.
• 流细胞计用于与显示的抗原库进行抗体相互作用的直接结合分析.
• 对33,930个原料的自动分析优化了克隆,以突变SARS-CoV-2受体结合域的所有表面暴露残留物.

主要成果:

• 所有生成的抗原变异都被功能表达.
• 该方法使用两个已知的参考结合剂进行了验证.
• 成功地绘制了三种新型治疗抗体的表皮.
• 评估了这些抗体与SARS-CoV-2 Omicron BA.2的结合.

结论:

• 哺乳动物抗原显示方法提供了一种高效的方法,用于快速建立抗原库和确定抗体表位.
• 这种技术对于加速针对新型病原体的治疗干预措施的开发特别有价值.
• 该方法简化了该过程,比传统的表位图绘制技术有了显著的进步.