对抗西瓜毒素CTX3C单克隆抗体的人性化和表征
Asako Yamaguchi1, Hiroaki Aino2, Takeshi Tsumuraya1
1Department of Biological Science, Graduate School of Science, Osaka Prefecture University, Sakai, Osaka, 599-8531, Japan; Department of Biological Chemistry, Graduate School of Science, Osaka Metropolitan University, Sakai, Osaka, 599-8531, Japan.
概括
研究人员开发了一种人性化的抗体,以中和ciguatoxins,这是ciguatera中毒的原因. 这种抗体表现出强烈的结合亲和力,为这种常见的食源性疾病提供了潜在的新疗法.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 毒理学 毒理学 毒理学
- 食品科学 食品科学 食品科学
背景情况:
- 卷虫中毒 (CP) 是一种由卷虫毒素 (CTXs) 引起的普遍的食物传播疾病,每年影响超过5万个人.
- 目前CP的管理依赖于症状和支持性护理,没有具体的治疗干预措施可用.
- 针对性治疗的开发,如治疗性抗体,对于解决CP至关重要.
研究的目的:
- 为了使一只小鼠的抗CTX3C抗体 (m10C9) 具有对西瓜毒素的中和活性.
- 设计一个优化的人性化抗体片段 (Fab),以增强针对CP的治疗潜力.
- 评估结合亲和力和关键残留物,负责人性化抗体中的抗原识别.
主要方法:
- 通过将互补性确定区域 (CDR) 移植到人类生殖系框架上,对小鼠抗CTX3C抗体 (m10C9) 的人性化.
- 通过逆变分析优化人性化抗体,以保持或增强结合亲和力.
- 优化的人性化抗体片段 (Opt.h10C9Fab) 与CTX3C的结合亲缘关系的表征,使用已确定的方法.
主要成果:
- 人化的抗体片段Opt.h10C9Fab对CTX3C表现出强烈的结合亲和力,其解离常数 (KD) 为19.0nM.
- 在框架区域内,特定的逆变异,即ArgL46和CysH94,被确定为维持抗原结合亲和力的关键.
- 人化过程成功地保留了原始小鼠抗体的中和能力.
结论:
- 优化的人性化抗体片段 (Opt.h10C9Fab) 代表了对虫中毒的有希望的治疗候选者.
- 这项研究确定了关键的氨基酸残留物,这些残留物对于维持高亲和度结合西瓜毒素至关重要.
- 这项工作为开发针对虫中毒的特定抗体治疗铺平了道路,解决了大量未满足的医疗需求.
