使用MADM-CloneSeq在现场绘制克隆相关细胞细胞系和细胞类型识别的协议
Giselle Cheung1, Florian M Pauler1, Peter Koppensteiner1
1Institute of Science and Technology Austria (ISTA), Am Campus 1, 3400 Klosterneuburg, Austria.
STAR protocols
|July 5, 2024
概括
这项研究提出了一种新的协议,可以同时追踪大脑中的细胞系和细胞类型. 这种方法有助于理解大脑发育和疾病,通过在现场分析与克隆相关的细胞.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 发展生物学 发展生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 了解克隆相关细胞的血统关系对于大脑本体生殖和细胞架构至关重要.
- 这种知识对于在健康和疾病状态下研究大脑功能至关重要.
研究的目的:
- 为在现场同时评估细胞谱系和细胞类型身份提供一个协议.
- 为了能够详细分析与其原生大脑环境中的克隆相关细胞.
主要方法:
- 准备和选的急性脑切片与克隆相关的细胞标记通过双标记器 (MADM) 的马赛克分析.
- 单个细胞的隔离用于下游RNA测序.
- 使用RNA测序数据进行细胞类型识别.
主要成果:
- 一个详细的协议,用于在现场同时进行血统和细胞类型分析.
- 在急性脑部切片中标记与克隆相关的细胞的MADM示范.
- 成功的RNA分离和测序用于细胞类型识别.
结论:
- 开发的协议允许同时评估细胞谱系和细胞类型身份.
- 这种方法为大脑发育和疾病机制提供了宝贵的见解.
- 该协议有助于在原生环境中研究与克隆相关的细胞.


