在马类血中通过固相提取和微流LC/MSMSMS的ACTH和胰岛素的检测
Rohan Steel1, Mark Timms1, Nicholas Bamford2
1Biological Research Unit, Racing Analytical Services Ltd, Flemington, Australia.
一种新的固相提取方法改善了在马血中检测胰岛素和上皮质激素 (ACTH) 等激素的检测. 这种技术适用于高通量分析,有助于诊断诸如 pituitary pars intermediate dysfunction (PPID) 等疾病.
科学领域:
- 兽医医学 兽医医学 兽医医学
- 分析化学 分析化学
- 生物化学 生化学
背景情况:
- 以前使用LC/MS检测马类血中的激素的方法依赖于抗体亲和力提取,限制了高通量分析.
- 这种限制阻碍了对涉及马匹激素失衡的疾病的常规诊断.
研究的目的:
- 开发一种更高效,更高通量的方法来检测马类血中的激素.
- 提高对胰岛素和ACTH等激素的分析灵敏度和稳定性.
主要方法:
- 开发了一种新的固相提取 (SPE) 方法,利用尺寸排除和逆相相互作用进行选择性激素提取.
- 用乙酸无水化在列上衍生,然后进行三性消化和三性的微LC/MSMS分析.
- 准备以同位素标记的内部标准,使用脱酸乙化物进行定量分析.
主要成果:
- 该SPE方法实现了大约80%的提取效率,用于包括ACTH和胰岛素在内的类激素.
- 与完整的荷尔蒙分析相比,对三性的分析显示了增强的灵敏度和色谱强度.
- 这种方法已成功应用于分析脑垂体帕斯中间功能障碍 (PPID) 的马的ACTH和胰岛素.
结论:
- 开发的SPE-LC/MSMS方法为马类激素分析提供了灵敏,坚固和高通量解决方案.
- 这一进步有助于更好地诊断和监测马的内分泌系统疾病,如PPID.
- 使用三性分析和柱上衍生法对以前的方法有了显著的改进.
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