结稀释牛血清白蛋白标准不会显著影响标准曲线
Rachelle Sheets1,2, Bhavik Rajaboina1,2,3, Caitlin E Bromberg1,2,3
1Department of Child Health, University of Arizona College of Medicine-Phoenix, Phoenix, Arizona, USA.
bioRxiv : the preprint server for biology
|July 9, 2024
概括
结和解蛋白质标准高达三倍并没有影响双酸 (BCA) 试验的准确性. 准备大量的牛血清白蛋白 (BSA) 标准并冷它们是蛋白质定量最可靠的方法.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 实验室科学 实验室科学
背景情况:
- 蛋白质定量对于许多实验室实验至关重要.
- 颜色测量试验,如双酸 (BCA) 试验,通常用于蛋白质度的确定.
- 精确的蛋白质定量依赖于可靠的标准曲线.
研究的目的:
- 确定最可复制和最准确的方法来量化蛋白质度随时间的推移.
- 调查冷和解对BCA测定中使用的蛋白质标准的影响.
- 评估标准准备中的人际和人内变异性.
主要方法:
- 牛血清白蛋白 (BSA) 标准被冷在-20°C或-80°C,并经历了最多三次冷解周期.
- 蛋白质度的测定是使用双酸 (BCA) 试验.
- 在标准制剂中评估了人际和人内变异性.
主要成果:
- 结和解蛋白质标准高达三倍并没有显著影响蛋白质度或标准曲线的准确性.
- 准备标准的不同个体引入的变异性大于结解的变异性.
- 在-20°C或-80°C的温度下储存大量的BSA标准,可以保持可重复性.
结论:
- 结和解蛋白质标准是长期储存和用于BCA测定的一种可行的方法.
- 通过创建大型的冷批量来规范蛋白质标准的制备,从而最大限度地减少了变化.
- 这种方法可以确保在实验系列中进行可复制和准确的蛋白质量测量.
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