淘汰运输器细胞系,以评估基质对冲流运输器的潜力
1Division of Applied Regulatory Science, Center for Drug Evaluation and Research, Food and Drug Administration, 10903 New Hampshire Ave., Silver Spring, Maryland, 20993-0002, USA. donna.volpe@fda.hhs.gov.
淘汰细胞系通过选择性地去除像P-glycoprotein (P-gp),BCRP和MRP2这样的流量载体来改善药物载体相互作用研究,从而实现更清晰的基质分析.
科学领域:
- 药理学 药理学是指药理学的学科.
- 分子生物学分子生物学
- 药物新陈代谢 药物新陈代谢
背景情况:
- 流体载体,包括P-糖蛋白 (P-gp),乳腺癌抗性蛋白 (BCRP) 和多药性耐药性载体2 (MRP2),显著影响药物的吸收,分布和分泌.
- 目前用于评估与这些载体的药物相互作用的双向细胞测定因缺乏选择性基质/抑制剂以及细胞系中多个载体的共同表达而受到限制.
研究的目的:
- 评估使用淘汰赛 (KO) 细胞系进行体外排泄细胞测定,以具体评估P-gp,BCRP和MRP2在药物运输中的作用.
- 为了确定P-gp,BCRP,MRP2的已知基质和野生类型和KO细胞系中的混合基质的排泄率 (ER).
主要方法:
- 使用了野生类型的C2BBe1细胞和相应的KO细胞系,缺乏P-gp,BCRP或MRP2表达.
- 确定模型基质的流量比 (ER):迪戈辛和帕克利塔塞尔 (P-gp),普拉佐辛和罗斯瓦斯塔丁 (BCRP),埃托波西德和奥尔梅沙坦 (MRP2) 以及甲基和米托克桑 (混合基质).
主要成果:
- 在P-gpKO细胞中,P-gp基质 (迪戈辛,帕克利塔塞尔) 的ER降至<2.
- 在BCRPKO细胞中,BCRP基质 (普拉佐辛,罗斯瓦斯塔丁) 的ER降至分别<3和<2.
- 在MRP2KO细胞中,MRP2基质 (埃托波西德,奥尔梅沙坦) 的ER降至<2. 混合基质ER也在单细胞和双KO细胞下降.
结论:
- 淘汰细胞系为解释复杂的药物载体相互作用提供了更准确的方法,减少了对非选择性抑制剂或基质的依赖.
- 这些KO模型对于评估药物与特定流量输送器的 afinities 是有价值的,特别是对于与多个输送器系统相互作用的药物.
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