用于临床应用的角膜层衍生的介质层细胞的替代性冷保护剂
Kristoffer Larsen1, Goran Petrovski1,2,3,4, Gerard Boix-Lemonche5
1Center for Eye Research and Innovative Diagnostics, Department of Ophthalmology, Institute of Clinical Medicine, Faculty of Medicine, University of Oslo, Oslo, Norway.
与二甲基硫氧化物 (DMSO) 相比,甘油提供了一种优越的方法来冷保存人类角膜流体衍生中介质流体细胞 (hCS-MSCs). 这一发现支持糖作为一种安全有效的替代品来保护这些有价值的细胞.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 组织工程是组织工程.
- 低温生物学 低温生物学
背景情况:
- 来自人类角膜层 (hCS-MSCs) 的介质细胞 (MSCs) 对于再生医学至关重要.
- 冷保存对于维持hCS-MSCs在临床应用中的活力和功能至关重要.
- 甲基硫氧化物 (DMSO) 是一种常用的冷防护剂 (CPA),但与其他药物 (如糖) 相比,其对hCS-MSCs的有效性尚未得到充分证实.
研究的目的:
- 为了比较糖与DMSO作为CPAs对冷保存hCS-MSCs的疗效.
- 评估不同CPA度和介质对冷保存后hCS-MSC活力和功能的影响.
- 为了确定冷保存hCS-MSCs的最佳条件,以便在未来治疗中使用.
主要方法:
- 从人类角膜中分离出hCS-MSC并进行了表征.
- 细胞在不同的培养介质中使用不同度的甘油和DMSO在受控的冷速度 (1°C/分钟) 进行了冷保存.
- 解后,细胞存活,粘附,增殖,形态和免疫类型使用流细胞计和显微镜进行了评估.
主要成果:
- 在10%甘油的最低必需介质 (MEM) 中冷保存hCS-MSCs,与其他测试条件相比,其增殖率显著更高.
- 糖保存的hCS-MSCs保持了良好的生存,粘附和细胞形态.
- 免疫类型表征证实MSC身份在用糖醇冷保存后被保留.
结论:
- 糖是一种安全有效的CPA用于冷保存hCS-MSCs,与DMSO相比,它提供更高的增殖率.
- 这些发现表明,甘可以取代DMSO作为hCS-MSC冷保存的标准CPA.
- 优化的基于甘油的冷保存协议可以确保长期可用hCS-MSCs的可用性用于治疗应用.
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