阐明生物制剂开发的挑战:在单克隆抗体配方中发现的CHO细胞衍生水解酶的系统表征

科学领域:

• 生物制药制造业 生物制药制造业
• 蛋白质化学 蛋白质化学
• 酶学 是一种酶学.

背景情况:

• 在中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞系中,由宿主细胞蛋白 (HCP) 降解的多酸盐 (PS) 损害了单克隆抗体 (mAb) 的稳定性和药物供应.
• 有限的数据存在于工业相关的PS降级HP,阻碍有效的缓解策略.

研究的目的:

• 从生物制药生产中相关的CHO细胞系中识别和功能性地表征PS降解化酶.
• 开发PS降解酶的风险评估框架,以改善生物过程的开发.

主要方法:

• 液体染色学-并联质谱学 (LC-MS/MS) 用于在mAb产品中识别候选水溶酶.
• 使用LPL淘汰CHO宿主细胞系和直角亲和染色法,过度表达和净化候选水解酶.
• 通过PS降解试验和pH稳定性选进行功能性表征.

主要成果:

• 确定了12种潜在的PS降解酶,其中9种被证实是活性的,包括脂蛋白脂酶 (LPL).
• 活性水溶酶表现出不同的水解活性和不同的pH最佳值.
• 一个风险矩阵根据表达,分泌和活性确定了四种关键化酶 (PAF-AH,LIPA,PPT1,LPLA2).

结论:

• 这项研究提供了来自CHO细胞的PS降解化酶的全面功能特征.
• 开发的风险矩阵为减少生物制药药品中PS降解提供了基础.
• 了解这些酶对于确保生物药物的稳定性和供应至关重要.