针对性基因组编辑恢复了成年小鼠的听觉功能,这些小鼠因人类微RNA突变引起的渐进性听力损失
Wenliang Zhu1,2, Wan Du1,2, Arun Prabhu Rameshbabu1,2
1Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, Graduate Program in Speech and Hearing Bioscience and Technology and Program in Neuroscience, Harvard Medical School, Boston, MA 02115, USA.
Science translational medicine
|July 10, 2024
概括
基因组编辑成功地恢复了成年小鼠的听力,这些小鼠具有微RNA-96突变. 这种疗法针对内耳,为主导性聋-50 (DFNA50) 提供了潜在的治疗方法.
科学领域:
- 遗传学 是一个遗传学.
- 耳鼻喉科 耳鼻喉科 耳鼻喉科
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 微RNA-96 (MIR96) 的突变与自身主导性聋-50 (DFNA50) 相关,这种疾病会导致迟发性听力损失.
- 虽然新生儿基因组编辑显示出希望,但临床应用需要在成人的内耳进行有效的编辑,这在很大程度上仍未被探索.
研究的目的:
- 开发和评估一种基因组编辑疗法,用于成人内耳MIR96突变 (14C>A).
- 评估由腺相关病毒 (AAV) 介导的CRISPR-Cas9输送用于治疗DFNA50.0.的疗效和安全性.
主要方法:
- 选CRISPR系统和优化Cas9表达和sgRNA支架的精确MIR96突变编辑.
- 黄金葡萄球菌Cas9 (SaCas9-KKH) 和sgRNA的AAV输送到前症状和症状的成年Mir96突变小鼠的尾管中.
- 使用AAV-sgmiR96-master针对所有已知的人类MIR96突变的双AAV系统的开发.
主要成果:
- 在AAV输送SaCas9-KKH和sgRNA后,在成年Mir96突变小鼠中观察到长期的听力改善.
- 当基因组编辑疗法在年轻时 (3周与6周相比) 进行时,基因组编辑疗法的有效性更高.
- 在体内基因组编辑表明,在过渡的Cas9表达和没有AAV基因组整合的情况下,在成年内耳中具有良好的安全性.
结论:
- 使用AAV传递SaCas9-KKH的体内基因组编辑在DFNA50.0.的小鼠模型中对长期听力恢复有效.
- 开发的双AAV系统和优化的sgRNA选择为治疗由MIR96突变引起的人类DFNA50提供了基础.
- 这一策略有可能用于治疗DFNA50患者,解决成人内耳编辑的需求.
