一种基于催化剂的Zwitterionic洗剂和单细胞蛋白质学,使用无损的微孔采集盘

科学领域:

• 蛋白质组学是指蛋白质组学
• 质谱测量质量谱测量
• 细胞生物学 细胞生物学

背景情况:

• 单细胞蛋白质组学在吞吐量,样本回收和可扩展性方面面临挑战.
• 纳米样本处理对于推进单细胞分析至关重要.
• 传统的质谱工作流程通常需要专门的设备进行单细胞分析.

研究的目的:

• 开发一种敏感的质谱 (MS) 分析方法,用于使用传统工作流程对单细胞进行分析.
• 为了克服吞吐量,样本回收和单细胞蛋白质组学可扩展性的瓶.
• 为了使有限的样本在没有专门的纳米体积处理设备的情况下进行超敏感蛋白质组学分析.

主要方法:

• 开发了一种与质量兼容的单一溶液,用于无细胞溶解和双重质量标签 (TMT) 标签,使用zwitterionic洗剂和催化剂.
• 使用微型HOLe光盘 (microHOLD) 进行单细胞溶解和TMT标签,无需热化.
• 通过液体染色学注射瓶中的微孔在单溶液中收集TMT标记的,以防止损失.

主要成果:

• 使用microHOLD设备在单一溶液中实现了无细胞溶解和TMT标签.
• 成功地应用了microHOLD方法来分析前列腺癌细胞中的蛋白质重编程.
• 在没有专门设备的情况下,证明了单细胞的高吞吐量和超敏感蛋白质组学分析.

结论:

• 微HOLD方法为单细胞蛋白质组学提供了一种新,敏感和高通量方法.
• 这种技术不仅仅是需要尖端的纳米容量处理设备.
• 该方法有助于在有限的样本中分析蛋白质组重编程,例如单细胞,从而促进癌症研究.