一种易于执行的微血管隔离和初级大脑内皮细胞培养方法,用于研究阿尔茨海默病

科学领域:

• 神经科学是一个神经科学.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 病理生理学 病理生理学

背景情况:

• 血脑屏障 (BBB) 功能障碍是阿尔茨海默病 (AD) 发病的早期事件.
• 大脑内皮细胞 (BEC) 是BBB的关键结构组成部分,它们的功能障碍对AD至关重要.
• 目前用于隔离BEC的现有方法是低效且耗时的.

研究的目的:

• 开发一个快速有效的协议来隔离高纯度的BECs.
• 为了使AD中BBB功能障碍的更好的体外建模成为可能.
• 为了促进AD病理生理学和治疗开发的研究.

主要方法:

• 开发了一种新的,精简的BEC隔离协议,没有转基因记者,流细胞计或磁珠.
• 从各种年龄段的野生型和APP/PS1 AD模型小鼠的皮质微血管中分离出BECs.
• 使用了免疫光,西部涂抹,实时PCR和跨井透性测试.

主要成果:

• 通过使用新的协议,成功分离了高纯度的BECs.
• 从AD模型小鼠和Aβ治疗的BEC中观察到减少的紧结蛋白 (Claudin-5,ZO-1) 和葡萄糖载体1.
• 在对粉样β (Aβ) 寡合体的反应中,证明了BBB透性的增加.

结论:

• 新的协议为BEC隔离提供了可靠的工具.
• 这种方法有助于在AD中BBB功能障碍的体外建模.
• 这些发现支持BBB损伤在AD中的作用,并为治疗策略开发提供了一个平台.