一个新的多重LAMP测试用于检测呼吸道人类腺病毒

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 分子诊断学 分子诊断
• 传染性疾病 传染性疾病

背景情况:

• 人类腺病毒 (HAdV) 是普遍存在的病原体,与各种疾病有关,特别是呼吸道感染 (RTIs).
• 目前HAdV的诊断局限性包括缺乏速度,可靠性和成本效益,可能导致错误诊断和不当的患者管理.
• 准确及时检测HAdVs对于RTIs的有效治疗至关重要.

研究的目的:

• 开发一种新的多重环介导同热放大 (LAMP) 试验,用于同时检测人类腺病毒B (HAdV-B),人类腺病毒C (HAdV-C) 和人类腺病毒E (HAdV-E).
• 为与RTIs相关的HAdV物种建立一个快速,具有成本效益和可视检测的诊断方法.
• 为了评估测试的性能与已建立的分子诊断技术对比.

主要方法:

• 设计了一种多重LAMP试验,针对特定的HAdV物种 (HAdV-B,HAdV-C,HAdV-E).
• 检测是通过安普利康的化曲线分析实现的,通过色度分析进行视觉确认,消除了对HAdV类型的需求.
• 测试灵敏度被确定,并使用in silico分析对其他呼吸道病原体进行评估,评估了原料的特异性. 对331个临床样本进行了验证.

主要成果:

• 多重LAMP测定证明可靠检测HAdV-B和HAdV-C在375个副本/反应和HAdV-E在750个副本/反应在35分钟内在60°C.
• 该试验没有显示出与其他常见的人类呼吸道病原体的in silico交叉反应性.
• 对临床样本的验证显示,与多重定量PCR (qPCR) 方法的一致性为90-94%,定量和视觉LAMP结果之间的一致性为99%.

结论:

• 开发的多重LAMP试验提供了一种快速,敏感和可视检测的方法,用于识别导致RTIs的关键HAdV物种.
• 这种试验是传统PCR的可行替代品,为诊断实验室节省了时间和资源.
• 该试验的简单性和速度使其适合于临床检测,提高了呼吸道感染的诊断可访问性.