使用海马XFe24分析仪实时测量小鼠眼睛后极线粒体呼吸的协议

科学领域:

• 眼科医生 眼科 眼科
• 细胞生物学 细胞生物学
• 线粒体研究 线粒体研究

背景情况:

• 视网膜色素上皮细胞 (RPE) 对于视力至关重要,并且在衰老和视网膜疾病期间易受功能障碍的影响.
• 线粒体功能障碍是RPE细胞损伤的关键因素,需要评估眼睛生物能量的方法.
• 目前评估后眼生物能量的方法有限.

研究的目的:

• 介绍一个详细的协议量化线粒体呼吸在老鼠的后眼杯.
• 建立一种可靠的方法来评估眼部生物能学在衰老和疾病的背景下.
• 为研究人员提供研究RPE细胞功能的工具.

主要方法:

• 从年轻和老老的小鼠身上解剖后眼杯 (RPE-choroid-sclera) 的方案被开发出来.
• 对线粒体呼吸试验的组织大小,药物度和循环条件进行了优化.
• 使用XF细胞线粒体应激试验量化准备的组织中的线粒体呼吸.

主要成果:

• 该协议允许在RPE-choroid-sclera复合体中量化线粒体呼吸.
• 优化步骤确保可靠和可重复的生物能源测量.
• 该方法适用于年轻和老年老鼠模型.

结论:

• 该协议为评估后眼线粒体功能提供了有价值的工具.
• 它促进了与年龄相关的视力下降和视网膜退行性疾病的研究.
• 该方法可以适应用于研究针对线粒体功能障碍的治疗干预措施.