通过使用下一代CRISPR工具,从成年干细胞衍生的有机体中创建异源性疾病模型的协议
Martina Celotti1, Lucca L M Derks2, Johan van Es1
1Hubrecht Institute, Royal Netherlands Academy of Arts and Sciences (KNAW) and University Medical Center Utrecht, 3584 CT Utrecht, the Netherlands; Oncode Institute, 3521 AL Utrecht, the Netherlands.
STAR protocols
|July 14, 2024
概括
这项研究引入了一种简化的协议,用于使用先进的CRISPR技术创建异构性疾病模型. 这些有机体模型有助于研究人员了解遗传变异.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 遗传学 是一个遗传学.
- 干细胞生物学 干细胞生物学
背景情况:
- 同源性疾病模型对于研究遗传变异对器官功能影响至关重要.
- 来自成年干细胞的器官提供了一个有前途的平台,用于疾病建模.
研究的目的:
- 提出一种协议,用于从成年干细胞衍生器官生成异构性疾病模型.
- 为了利用下一代的CRISPR工具,实现高效的基因工程.
主要方法:
- 单向导RNA (sgRNA) 设计和克隆的详细步骤.
- 用于将CRISPR组件引入有机体的电穿孔技术.
- 选择电孔细胞和产生克隆线的方法.
主要成果:
- 下一代CRISPR工具通过不需要双链断裂 (DSB) 诱导,简化了体外疾病模型的生成.
- 该协议有助于在有机动物中创建精确的基因修饰.
结论:
- 提出的协议提供了一种简化方法,用于生成复杂的异构性有机体疾病模型.
- 这种方法在受控的体外环境中推进了对遗传变异及其功能后果的研究.


