有效的分泌表达和净化在三种不溶性氨基化酶上,以通过Pichia pastoris进行解
Xuanjun Zhang1,2, Xue Ma1,2, Guangqing Dai1
1State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, School of Tea and Food Science Technology, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, People's Republic of China.
Journal of agricultural and food chemistry
|July 15, 2024
概括
两种新型的胺基酶,ADH1和AMD3,已被开发用于甲状腺毒素A (OTA) 排毒. 与大肠杆菌相比,Pichia pastoris中的分泌表达显著提高了蛋白质产量和活性.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 菌类毒理学 菌类毒理学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 毒素A (OTA) 是一种有毒的真菌毒素,会污染农产品.
- 生物酶为OTA提供了一个有希望的排毒策略.
- 之前的研究已经确定了阿米多酶ADH3,但需要新的酶.
研究的目的:
- 为了获得和描述用于OTA降解的新型胺基酸酶.
- 为了提高OTA降解酶的表达和产量.
- 为了比较不同表达系统的有效性,用于工业应用.
主要方法:
- 选高副本数集成用于酶表达.
- 使用Pichia pastoris GS115进行高效的分泌表达.
- 量化蛋白质产量和确定催化效率 (Kcat/Km).
主要成果:
- 成功表达了两个新型的氨基基酸酶,ADH1和AMD3.
- 与大肠杆菌相比,P. pastoris的分泌表达产生了显著更高的活性蛋白 (15.78-51.53倍)
- AMD3表现出最高的催化效率 (371.99 s-1 mM-1),其次是ADH1和ADH3.
结论:
- 皮奇亚牧草的分泌表达是一种高效的系统,可以产生OTA降解的胺基酸酶.
- 新型胺基酸酶ADH1和AMD3在OTA排毒方面表现优于ADH3.
- 这些发现为生物酶在真菌毒素管理中的工业化应用铺平了道路.


