在两个生物化学分析中,Dirofilaria immitis microfilariae的菌株水平变化

科学领域:

• 兽医寄生虫学 兽医寄生虫学
• 分子生物学分子生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 在Dirofilaria immitis中报告的宏环乳耐药性正在增加,对狗的健康构成重大威胁.
• 虽然基于DNA的测试存在,但它们的成本可能过高.
• 之前的研究验证了生物化学测定 (Resazurin减少和Hoechst 33342排泄) 以检测D. immitis分离物中的代谢和P-糖蛋白活性差异.

研究的目的:

• 为了进一步优化生物化学分析,以检测Dirofilaria immitis分离物中的差异.
• 研究各种测定参数和体外药物治疗对D. immitis microfilariae的影响.
• 通过检查药物代谢和运输途径中的基因表达来探索测试变异的分子基础.

主要方法:

• 优化微细菌种植密度和化时间,用于Resazurin降低和Hoechst 33342流量测试.
• 在体外对D. immitis分离物的治疗 (JYD-34,大头,伯克利,乔治亚III,LOL) 用ivermectin和doxycycline.
• 对ABC载体和细胞染色体P450基因家族进行定量PCR (qPCR) 分析,以评估分子变异.

主要成果:

• 在不同的D. immitis菌株中观察到代谢和ABC转运体活性的显著变化.
• 没有发现甲虫耐药性状态和观察到的代谢或P-糖蛋白排泄活动之间的直接相关性.
• 在隔离物之间确定了ABC载体和细胞染色体P450s基因表达的基线差异.

结论:

• 优化的生物化学试验为Dirofilaria immitis分离物的生物化学多样性提供了宝贵的见解.
• 这些测试有可能在未来开发体外诊断工具,以区分易感和耐药的D. immitis菌株.
• 了解生物化学变异对于开发有效的策略来对抗耐药性心感染至关重要.