使用光免疫传感器 (quenchbody) 作为纤维化生物标志物的一步检测III型公原N终端
Joon-Yeop Yi1, Jaewon Ryu2, Yujin Jeong3
1Doping Control Center, Korea Institute of Science and Technology, Seoul, 02792, Republic of Korea; Interdisciplinary Program of Bioengineering, Seoul National University, Seoul, 08826, Republic of Korea.
Analytica chimica acta
|July 19, 2024
概括
一种针对Procollagen III型N-终端 (P-III-NP) 的新型单阶段免疫试验可快速检测纤维化生物标志物. 这种火体方法在5分钟内提供了结果,改善了早期诊断和治疗的可能性.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 免疫技术是一种免疫技术.
- 生物标志物发现发现
背景情况:
- 聚原III型N终端 (P-III-NP) 是肝脏和心脏纤维化的一个关键生物标志物.
- 目前的P-III-NP检测方法 (ELISA,RIA) 是耗时的,超过3小时.
- 快速生物标志物测试对于早期诊断和及时治疗纤维化疾病至关重要.
研究的目的:
- 开发一种快速,单步免疫测试,用于检测P-III-NP.
- 使用一种新的灭体光标记免疫传感器,用于立即信号生成.
- 为了促进纤维生物标志物的高通量和敏感测试.
主要方法:
- 带有Cys标签的工程抗P-III-NP单链变量片段 (scFv).
- 在大肠杆菌中表达的scFv,达到9.8毫克L-1的产量.
- 标有TAMRA-C6的scFv通过maleimide-thiol点击化学产生火体.
主要成果:
- 开发的灭体免疫试验检测到具有抗原依赖光的P-III-NP.
- 敏感度在缓冲剂中达到0.46 ng mL-1,在2%的人类血清中达到1.0 ng mL-1.
- 该测试在5分钟的时间内提供了定性和定量结果.
结论:
- 一步式的P-III-NP检测方法是快速的,在5分钟内完成.
- 这种测试具有敏感性,可以适应使用96井平台和人体血清进行高通量查.
- 开发的灭体免疫试验为纤维细胞生物标志物测试提供了重大进展.
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