通过杂交LC-MS/MS的抗体-寡核酸合体的自由反感性寡核酸有效载荷的生物分析

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 药理学 药理学 是一个学科.
• 分析化学 分析化学

背景情况:

• 反感性寡核酸 (ASO) 与类或抗体等向部分结合,以改善组织输送.
• 准确量化自由ASO有效载荷对于表征这些结合物的药理动力学/药理动力学 (PK/PD) 特性和生物分布至关重要.
• 现有的方法可能无法在复杂的生物矩阵中充分区分自由ASO和结合形式.

研究的目的:

• 开发和验证一种敏感的生物分析方法,用于量化生物组织中自由的反意义寡核酸 (ASOs).
• 为了能够准确地评估ASO有效载荷的药理动力学和生物分布,在使用抗体-ASO或Fab-ASO合物后.
• 提供一个强大的方法论,用于生物分析在各种矩阵,包括组织,血和血清.

主要方法:

• 开发一种基于杂交的液态染色学-并联质谱法 (LC-MS/MS) 试验.
• 样品制备的优化,以确保在完整的结合物 (Fab-ASO) 和链接器结合的ASO (ASO-linker) 存在时选择性检测自由ASO.
• 在相关的生物矩阵中验证方法的准确性,精度,灵敏度和选择性.

主要成果:

• 成功建立了一个强大的LC-MS/MS方法论,用于量化自由ASO.
• 该方法表现出高灵敏度和特异性,使得可以准确测量小鼠肝脏和胃外皮组织中自由ASO度.
• 该测试有效地将自由ASO与Fab-ASO和ASO-linker区分开来,证实了它在复杂的生物样本中的有用性.

结论:

• 开发的基于混合化的LC-MS/MS方法提供了组织中自由ASO的准确量化.
• 这种方法对于描述抗体-ASO和Fab-ASO合物的PK/PD和生物分布至关重要.
• 验证的试验适用于各种组织和样本类型中自由ASO的生物分析,支持药物开发工作.