含有碳нил的化合物 (Sugar) 的12-Plex同位素多重标签试剂 标签启用高通量定量糖化合物
1Department of Chemistry, University of Wisconsin-Madison, Madison, WI, USA.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|July 25, 2024
概括
研究人员为N-甘氨酸分析开发了12个复合的同位素质谱 (MS) 标签. 这种方法提高了三倍的吞吐量,使得强大的定量糖化学品,使得高吞吐量分析在一次LC-MS/MS注射.
科学领域:
- 生物化学 生物化学
- 分析化学 分析化学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 甘氨酸是参与细胞识别和通信的重要生物分子.
- 质谱法 (MS) 和化学标签已经推进了糖分析.
- 高通量,定量糖甘分析需要改进的方法.
研究的目的:
- 为了提高N-glycan分析的吞吐量.
- 制定一个多重复合的定量糖化合物策略.
- 详细介绍12倍数糖标签合成和应用的方法.
主要方法:
- 合成12复数糖 (含碳烯化合物) 的同位素标签.
- 从蛋白质中释放和标记N-甘氨酸.
- 高分辨率液态染色学-并联质谱学 (LC-MS/MS) 分析.
- 数据处理用于多重复合的定量糖化合物.
主要成果:
- 使用质量缺陷策略,将SUGAR标签从4个复数扩展到12个复数.
- 与以前的方法相比,实现了产量增加三倍.
- 在一次LC-MS/MS注射中启用高通量N-甘氨酸分析.
结论:
- 12倍糖标签策略显著提高了N-糖甘量化的吞吐量.
- 这种方法促进了强大的和高通量量的定量糖化学品.
- 为合成,标记,分析和数据处理提供了详细的协议.
