集成的基于滴滴的数字循环介导的同热放大微流体芯片,具有滴滴生成,化和连续光检测

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分析化学 分析化学
• 微流体学 微流体学

背景情况:

• 核酸放大和检测在分子诊断中至关重要.
• 传统方法通常涉及多个步骤,增加污染风险并降低效率.
• 基于滴滴的数字分析为核酸量化提供了高灵敏度和吞吐量.

研究的目的:

• 开发一个集成的微流体芯片,用于基于滴滴的数字循环介导同热放大 (LAMP).
• 为了克服泡生成的挑战,并使得正/负滴的同时检测和计数.
• 为了实现快速,准确和无污染的核酸量化.

主要方法:

• 在单个微流体芯片上整合样本分区,化和连续光检测.
• 使用油相和玻璃覆盖来防止LAMP期间的泡形成.
• 采用两种光强度值来同时进行滴滴分析.
• 使用开发的平台量化 *金黄色葡萄球菌*.

主要成果:

• 芯片在10分钟内从5μL样本中分离了约6000滴 (110μm直径,0.82%CV).
• 获得了非常准确的相关系数 (R = 0.9998) 用于量化.
• 达到了1.7 × 10²副本/μL的检测极限,用于金黄色葡萄球菌.
• 从滴滴生成到结果的整个过程最多花了70分钟.

结论:

• 集成的微流体芯片为液滴数字LAMP提供了精简,高效和准确的平台.
• 这种方法尽量减少样品损失和污染,提高诊断可靠性.
• 该平台在各种应用中展示了快速和灵敏的核酸量化显著潜力.