一个循环介导的同热放大试验,用于快速检测Didymella segeticola,导致茶叶斑点
Yiyi Tu1, Yuchun Wang1,2, Hong Jiang1
1College of Tea Science and Tea Culture, Zhejiang A&F University, Hangzhou 311300, China.
Journal of fungi (Basel, Switzerland)
|July 26, 2024
概括
一种新的循环介导异热放大 (LAMP) 试验能够快速而准确地检测出由Didymella segeticola引起的茶叶斑点病. 这种敏感的方法有助于早期诊断和可持续管理这种重要的茶叶植物病原体.
科学领域:
- 植物病理学 植物病理学
- 分子诊断学 分子诊断学
- 农业科学 农业科学
背景情况:
- 茶叶斑点,由Didymella segeticola引起,显著降低茶叶植物 (Camellia sinensis) 的产量和质量.
- 早期和准确的疾病诊断对于有效的管理策略至关重要.
- 循环介导同热放大 (LAMP) 提供了一种敏感,特定和简单的诊断方法.
研究的目的:
- 开发一种快速,可视和高度敏感的LAMP测定方法,用于特定检测Didymella segeticola.
- 为了验证开发的LAMP测定对其他茶叶植物病原体和相关物种的特异性和敏感性.
- 评估LAMP试验在天然感染的茶叶植物中诊断茶叶斑点的有用性.
主要方法:
- 设计和优化了针对特定序列的LAMP原料,Didymella segeticola (NCBI加入号:OR987684).
- 对常见的茶病原体和其他迪迪梅拉物种的评估测试特异性.
- 使用基因组DNA的连续稀释确定检测极限,并对实验性注射和自然感染的茶叶进行测试.
主要成果:
- 开发的LAMP测试显示了对Didymella segeticola的高特异性,使其与相关的病原体区分开来.
- 该试验在65°C温度下60分钟内达到1fg/μL基因组DNA的最小检测极限.
- 在注射后72小时,在患病的茶叶中成功检测到Didymella segeticola,并在18种生殖质中的现场采集的样本中成功检测到.
结论:
- 一种特定,敏感和简单的LAMP方法用于Didymella segeticola检测已经成功建立.
- 这种测试为评估茶叶斑点流行率提供了可靠的技术支持.
- 开发的诊断工具有助于在茶叶种植中可持续管理茶叶斑点病.
