开发一种在高频率下转化为新出现的人类真菌病原体的穿载体:Candida auris

科学领域:

• 菌分子生物学 菌分子生物学
• 医学真菌学 医学真菌学
• 遗传学 是一个遗传学.

背景情况:

• 由于缺乏合适的等离子体,对*Candida auris*的分子操纵受到阻碍.
• 在C. auris*中现有的转化方法缺乏高效的克隆或穿载体.
• 在 *C. auris* 中的中心序列是特征性的,但不作为分子工具使用.

研究的目的:

• 为了确定*C. auris*能够形成稳定,可转化等离子体的中心层序列.
• 为*C. auris*分子研究开发一种新的航天器载体.
• 评估中心分子衍生序列作为等离子体维护元素的实用性.

主要方法:

• 克隆所有七个 *C. auris* 中心层序列.
• 对克隆序列进行变换频率和等离子体稳定性的测试.
• 使用高频变换子克隆构建和描述一个穿向量.
• 在大肠杆菌中拯救和分析等离子体.
• 在 *C. auris* 类别中评估转换效率.

主要成果:

• 在测试的中位数序列中,转换频率在测试的中位数序列中差异很大.
• 一个1.7Kb的亚克隆在等离子体中表现出高的转变频率和ARS类属性.
• 开发的穿载体在选择下稳定 (每细胞约1个副本),但在没有选择的情况下很容易丢失.
• 即使有了大型插入,等离子体也在C. auris中保持完整,并转化了所有四个C. auris.

结论:

• *C. auris* 中心层序列可以被利用来制造功能性质粒.
• 开发的等离子体是*C. auris*研究的宝贵和多功能工具.
• 这种新试剂将大大推进对*Candida auris*作为人类真菌病原体的研究.