使用基于RPA-CRISPR/EsCas13d的双读输出便携式平台快速,灵敏和可视检测伪狂犬病病毒

科学领域:

• 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断 兽医诊断
• 分子生物学分子生物学
• 生物感知技术的技术

背景情况:

• 伪病毒 (PRV) 对全球猪生产和公共健康构成重大威胁.
• 有效控制和根除传染病需要快速,负担得起,准确的诊断方法.
• 当前的诊断工具可能缺乏可移植性或现场部署的速度.

研究的目的:

• 开发一个便携式检测平台,用于快速和灵敏的PRV诊断.
• 通过使用各种样本类型评估RPA-CRISPR/EsCas13d平台的性能.
• 建立一个概念验证,用于对PRV.的临床诊断测试.

主要方法:

• 开发一个便携式检测平台,将复合酶聚合酶放大 (RPA) 与CRISPR/Cas13d技术相结合.
• 使用快速预放大,通过横流测定或视觉光,在一小时内获得结果.
• 通过使用50个现场采集的猪样本 (组织,口服液,血清) 对实时定量聚合酶链反应 (qPCR) 验证平台.

主要成果:

• RPA-CRISPR/EsCas13d平台表现出高灵敏度 (1拷贝/μL) 和高特异性.
• 没有观察到与常见的猪病原体的交叉反应.
• 对五十个猪样本的测试显示了34.0%的PRV阳性,与qPCR结果一致.
• 该平台表现出稳定性,效率和最低设备要求.

结论:

• 开发的便携式RPA-CRISPR/EsCas13d平台提供了一种灵敏,快速和高效的PRV检测方法.
• 这项技术有望在偏远和资源有限的地区进行临床诊断.
• 它代表了全球监测伪狂热和其他传染病的潜在工具.