使用流细胞计量测试,量化巨细胞吞和酸性化亡细胞的Efferocytosis测试
Xun Wu1, Ziyi Wang1, Tyler Shern1
1Cardiometabolic Genomics Program, Division of Cardiology, Department of Medicine, Columbia University Irving Medical Center, New York, NY, USA.
STAR protocols
|July 28, 2024
概括
这项研究提出了一项协议,以测量巨细胞如何吞和酸化亡细胞,这对于解决炎症和保持健康至关重要. 该方法使用光染料和流细胞计来准确量化.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 巨细胞增生对于维持组织平衡和解决炎症至关重要.
- 巨细胞对亡细胞的有效清除可以防止二次亡,并限制自身免疫反应.
研究的目的:
- 提供一个详细的方案,以评估巨细胞衰变,特别是吞和随后的亡细胞 (ACs) 的酸化.
- 为了使研究人员能够使用标准化方法量化细胞化中的这些关键步骤.
主要方法:
- 制备骨髓衍生的巨细胞 (BMDMs) 和腹巨细胞 (PMs).
- 使用pH敏感 (pHrodo-Red succinimidyl ester) 和pH不敏感 (Hoechst) 染料对AC进行光标记.
- 标记的ACs与巨细胞的化,以促进细胞.
- 通过流细胞计量量化吞和酸化的量化.
主要成果:
- 该协议允许定量评估食率和巨细胞在细胞分裂期间的酸化能力.
- 成功的实施使得基于 lysosomal 酸化的早期和晚期的细胞分裂的区别成为可能.
结论:
- 该协议提供了一种强大且可复制的方法来研究巨细胞衰变.
- 精确测量细胞,包括酸化,对于理解炎症解消和开发向疗法至关重要.


