在C. elegans受精和早期发育期间,活体视觉化过渡物
Michaela Foley1, Katie Toperzer1, Sara Sornat1
1Florida Institute of Technology.
Journal of visualized experiments : JoVE
|July 29, 2024
概括
研究人员开发了C. elegans中的记者CaFE,以可视化受精和早期胚胎生成. 这种工具有助于研究卵细胞到胚胎的过渡,并揭示了在发育过程中信号传递的新见解.
科学领域:
- 发育生物学 发展生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 遗传学 是一个遗传学.
背景情况:
- 离子是卵细胞到胚胎过渡 (OET) 和早期胚胎发生过程中的关键信号分子.
- 线虫Caenorhabditis elegans为OET研究提供了独特的优势,因为它的透明度和有序的淋巴体结构.
研究的目的:
- 开发一种基因编码的指标 (CaFE),用于实时可视化C. elegans.中的受精.
- 为利用CaFE报告员剖析OET和早期胚胎发生提供协议.
主要方法:
- 修改jGCaMP7s以创建CaFE报告员,将其设计成一个安全港口位置.
- 开发用于虫同步,RNAi敲击,成像安装和可视化的协议.
- 产生额外的C. elegans菌株以支持OET和胚胎生成研究.
主要成果:
- 在受精时,CaFE报告员显示出强烈的信号,但对虫生理或生育能力没有显著影响.
- 通过ipp-5RNAi证明了双排卵,只有第一个卵细胞立即受精.
- 在早期胚胎发生过程中发现了单细胞过渡体,表明CaFE在发育过程中的持久性.
结论:
- 该CaFE报告员是研究C. elegans受精和胚胎生成的有价值的体内工具.
- CaFE促进了调节内部受精和早期发育的细胞-细胞动态的研究.
- 由于CaFE报告员的简单性,它非常适合本科研究课程 (CUREs).
