一个可定制和定义的介质支持培养白虫,金黄色葡萄球菌和人类口腔上皮细胞
Raymond Pasman1, Jianbo Zhang1, Sebastian A J Zaat2
1Department of Molecular Biology and Microbial Food Safety, Swammerdam Institute for Life Sciences, University of Amsterdam, Amsterdam, the Netherlands.
Applied and environmental microbiology
|July 29, 2024
概括
研究人员开发了mDMEM-DMP,这是一种多功能培养基,可以支持金黄色葡萄球菌,白菌和人类口腔细胞的同时生长. 这种定义的媒介使得多个王国的研究和高级分析,如OMICs.
科学领域:
- 微生物学和细胞生物学
- 宿主-微生物相互作用
- 合成生物学 合成生物学
背景情况:
- 研究不同微生物王国 (如真菌和细菌) 与宿主细胞之间的相互作用需要专门的培养介质.
- 现有的媒介往往无法支持各种微生物和人类细胞的共同培养,阻碍了对协同感染的研究.
- 对于高分辨率分析,如代谢学和蛋白质学,需要明确的,可定制的介质至关重要.
研究的目的:
- 开发一个完全定义的,可定制的合成培养基,用于多个王国共同培养*金黄色葡萄球菌*和人类口腔细胞系.
- 优化介质成分,以支持微生物和人类细胞的生长和代谢活动.
- 为研究人与微生物相互作用和微生物分子生理学提供一个多功能平台.
主要方法:
- 调整Dulbecco修改的媒介 (DMEM) 来创建一个最小版本 (mDMEM).
- 系统补充mDMEM的各种成分 (德克斯特,氨基酸,酸盐,Glutamax,HEPES),以评估它们对微生物和人类细胞生长的影响.
- 优化介质 (mDMEM-DMP) 的评估,以支持 *S. aureus*, *C. albicans* 和人类口腔细胞系 (Ca9-22,HO1N1) 的单种和共同种植,使用生长试验和代谢活动测量.
主要成果:
- 开发的介质mDMEM-DMP成功支持了*S. aureus*和*C. albicans* (包括形) 的生长,并保持了人类口腔细胞系的代谢活性.
- 补充25毫米的HEPES改善了*S. aureus*的生长和长时间的pH稳定,而更高的度没有提供额外的生长益处.
- 添加HEPES降低了*C. albicans*的最大光密度,只有缓冲的mDMEM-DMP (100mM HEPES) 维持了人类细胞代谢活动24小时.
结论:
- mDMEM-DMP是一种多功能和强大的合成培养基,能够支持*S. aureus*,*C. albicans*和人类口腔细胞的生长.
- 这种可定制的媒介为研究复杂的人与微生物相互作用和微生物生理学提供了宝贵的平台.
- mDMEM-DMP的定义性质适用于敏感的分析技术,促进了宿主-病原体动态研究.
