使用Jurkat报告员T细胞系来评估新型仿真抗原受体的功能
Farhana Jahan1, Jan Koski1, Diana Schenkwein2
1R&D, Finnish Red Cross Blood Service, Helsinki, Finland.
Frontiers in molecular medicine
|August 1, 2024
概括
一种新型的仿真抗原受体 (CAR) 骨干,FiCAR,是使用信号调节蛋白α (SIRPα) 域进行工程的. 一个Jurkat记者系统成功地加速了FiCAR T细胞用于癌症免疫治疗的分析.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物技术是生物技术.
- 在瘤学瘤学.
背景情况:
- 化学抗原受体 (CAR) T细胞疗法在癌症免疫治疗方面显示出前景.
- 提高CAR-T细胞对各种癌症的安全性和有效性是一个活跃的研究领域.
- 之前开发了一种新的CAR骨干,FiCAR,利用信号调节蛋白α (SIRPα) 来源的免疫球蛋白类域作为间隔器.
研究的目的:
- 通过创建具有不同间隔长度和目标抗原的变体来探索FiCAR骨干的多功能性.
- 开发一种用于分析新型CAR结构的加快方法.
- 评估工程FiCAR T细胞的功能,信号和细胞毒性活动.
主要方法:
- 设计和制造了七种不同的FiCAR,具有不同的SIRPα间距长度和单链可变片段 (scFv) 域.
- 利用lentiviral转导引入FiCAR基因到Jurkat记者T细胞表达光标记物.
- 分析了CAR表达,T细胞信号传递 (NFκβ,NFAT,PI3K-AKT,AP-1),增强信号传递和细胞毒性活性,使用流动细胞计,杀死试验和蛋白质组分析.
主要成果:
- 在Jurkat记者细胞中成功设计并表达了七种FiCAR变体.
- 经证明的FiCAR参与导致强大的NFκβ和NFAT信号激活,由记者基因表达证实.
- 已确认配备FiCAR的Jurkat细胞对细胞表现出细胞毒性活性,并揭示了下游信号通路,包括CD3ζ/ZAP70-SLP-76-PLCγ和PI3K-AKT-NFκB.
结论:
- FiCAR骨干是多功能性的,可以通过不同长度的SIRPα衍生的Ig类域进行修改.
- 设计的FiCAR可以与各种scFv目标绑定域一起工作.
- 朱卡特报告员系统为评估癌症免疫疗法研究中新型CARs的表达,信号,增强信号和细胞毒性潜力提供了一个有效的平台.
