在舌头抽样样中检测出Mycobacterium tuberculosisDNA的高灵敏度检测
Alaina M Olson1, Rachel C Wood1, Kris M Weigel1
1Department of Environmental and Occupational Health Sciences, University of Washington, Seattle, Washington, United States of America.
medRxiv : the preprint server for health sciences
|August 7, 2024
概括
两种新的方法增强了用于结核病 (TB) 诊断的舌头抽样检测. 这些策略改善了对Mycobacterium tuberculosis (MTB) DNA的检测,为结核病例提供了分析更容易获得的替代方案.
科学领域:
- 微生物学 微生物学
- 分子诊断学 分子诊断
- 传染病研究 传染病研究
背景情况:
- 唾液分析是结核病 (TB) 诊断的标准,但可访问性和患者合规性可能具有挑战性.
- 舌头拭子 (TS) 采样为检测Mycobacterium tuberculosis (MTB) DNA提供了一个有希望的,不那么侵入性的替代方案.
- 之前的TS方法与相比显示出较低的灵敏度,需要改进的诊断策略.
研究的目的:
- 评估两种新的策略,以提高结核病检测的灵敏度和准确性,使用舌头拭子.
- 将这些改进的TS方法的性能与已建立的唾液微生物参考标准 (MRS) 进行比较.
主要方法:
- 策略1:离心,从舌头拭子中集细菌,然后进行机械溶解和双目标qPCR用于MTB DNA检测.
- 策略2:序列特定磁性捕获 (SSMaC) 来分离MTB DNA,涉及机械溶解,蛋白酶K消化,探针杂交和磁性度在qPCR之前.
- 这两种方法都使用双目标qPCR检测MTB插入元件IS6110和IS1081.
主要成果:
- 离心策略实现了83%的灵敏度和100%的特异性检测MTBDNA在舌头抽样从疑似结核病患者.
- 该SSMaC战略表现出更高的性能,其灵敏度为90%,特异性为97%.
- 分割实验证实,MTB DNA 信号的大部分存在于舌头拭片样本的沉积分数中.
结论:
- 这两种开发的策略都显著提高了使用舌头拭子检测结核病的准确性.
- 通过舌头扫描,SSMaC方法对高灵敏度,可自动化结核病诊断具有特别的希望.
- 这些进展为全球更容易获得和更有效地检测结核病例提供了潜力.
