监测活细胞中的线粒动力学
Christina Karantanou1,2, Sofia-Iris Bibli3,4,5
1Department of Vascular Dysfunction, European Center for Angioscience (ECAS), Medical Faculty Mannheim, Heidelberg University, Mannheim, Germany.
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
|August 8, 2024
概括
本协议详细介绍了一种活细胞试验,用于测量线粒体流量,从而实时监测线粒体选择性自动态. 这种定量方法有助于理解线粒调节和可逆性.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 自学研究 自学研究
- 线粒体动力学的动力学
背景情况:
- 线粒是一种关键的细胞过程,被广泛研究,使用的方法往往忽略了它的动态性质.
- 现有的技术主要提供终端测量,限制了对线粒的实时调节和可逆性的洞察力.
研究的目的:
- 通过使用活细胞mt-KEIMA方法来评估线粒流的全面,逐步的协议.
- 为了使线粒体选择性自动态的敏感,可复制和定量实时监测.
主要方法:
- 使用一种lentiviral方法在细胞系中表达mt-KEIMA记者.
- 采用活细胞成像系统,以时间间隔观察线粒记者细胞.
- 通过活细胞成像数据量化线粒细胞流.
主要成果:
- 该协议是灵敏的,可重复的,定量的,易于执行的.
- 成功应用于研究对化学诱导剂和随着时间的推移而发生的遗传修饰的反应中的线粒流.
- 在实时监测线粒体选择性自的过程中表现出有效性.
结论:
- 这种活细胞线粒细胞衰变追踪协议增强了对线粒细胞衰变动态,调节和可逆性的理解.
- 该试验适用于高通量选化学物质或影响线粒的基因编辑库.
