一个收集,分化,冷保存和复苏初级小鼠骨髓衍生巨细胞 (BMDM) 的综合性协议
Abby M Luu1, Kelly M Shepardson2, Agnieszka Rynda-Apple1
1Department of Microbiology and Cell Biology, Montana State University, Bozeman, Montana, USA.
Immunological investigations
|August 8, 2024
概括
主要的小鼠骨髓衍生巨细胞 (BMDMs) 可以成功地冷保存和复苏. 这些恢复的BMDM保持了生存能力和清除金黄色葡萄球菌的能力.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 微生物学 微生物学
背景情况:
- 试管细胞系在免疫学中很有价值,但由于它们的"不朽"性质,它们存在局限性.
- 来自模型生物的原始细胞提供了一个替代方案,但对小鼠骨髓衍生巨细胞 (BMDMs) 缺乏全面的协议.
- 这项研究解决了从骨髓采集到冷保存和小鼠细胞复苏的完整工作流程的需要.
研究的目的:
- 建立和验证一种用于冷保存和复苏初级小鼠骨髓衍生巨细胞 (BMDMs) 的协议.
- 评估冷保存和复苏的BMDMs的生存能力和功能能力.
主要方法:
- 从C57BL6小鼠中收集了骨髓细胞.
- 使用L929条件介质将细胞分化为巨细胞.
- 进行了冷保存和复苏手术,随后进行了包括显微镜,差异染色,免疫细胞化学和蓝活力测定在内的评估.
主要成果:
- 经过冷保存和随后的复苏的初级小鼠BMDM显示出高生存能力.
- 经过复苏的BMDM保留了他们整体清除黄金葡萄球菌的能力.
- 显微镜,染色和免疫细胞化学证实了解后的细胞完整性和功能.
结论:
- 冷保存和复苏的初级小鼠BMDMs是免疫学研究的可行的细胞来源.
- 这些细胞在冷保存后保持基本功能,例如病原体清除.
- 开发的协议支持在长期免疫学研究中使用初级小鼠BMDMs.
