准备样本和收集数据,用于对哺乳动物细胞单层的连续块面扫描电子显微镜
Noelle V Antao1, Joseph Sall2, Christopher Petzold2
1Department of Cell Biology, New York University School of Medicine, New York, NY, United States of America.
PloS one
|August 9, 2024
概括
本研究详细介绍了准备体外组织培养细胞用于使用串行块面扫描电子显微镜 (SBF-SEM) 进行3D超结构分析的协议. 优化的方法增强了培养细胞的3D成像,用于详细的生物研究.
科学领域:
- 生物科学 生物科学
- 显微镜的使用方法
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 体积电子显微镜为生物样本提供3D超结构分析.
- 串联块面扫描电子显微镜 (SBF-SEM) 是这种分析的一个关键技术.
- 适应SBF-SEM用于体外组织培养需要特定的样本准备协议.
研究的目的:
- 为SBF-SEM提供嵌入体外组织培养细胞的逐步协议.
- 描述细胞颗粒和面部嵌入的方法.
- 为了促进相关光和电子显微镜 (CLEM) 工作流程,用于针对性的SBF-SEM成像.
主要方法:
- 固定,染色和嵌入附着组织培养细胞的详细协议.
- 有两种嵌入技术:细胞颗粒和面部嵌入.
- 整合光显微镜用于事件识别,随后进行SBF-SEM成像.
主要成果:
- 为SBF-SEM准备体外组织培养细胞的既定协议.
- 证明了面向嵌入用于CLEM工作流程的可行性.
- 提供了关于优化SBF-SEM.数据收集参数的指导.
结论:
- 描述的协议允许使用SBF-SEM进行体外组织培养细胞的高分辨率3D超结构分析.
- 面对面嵌入与CLEM相结合是一种强大的方法,用于研究3D中的特定细胞事件.
- 仔细的样本准备和对成像变量的考虑对于成功的SBF-SEM分析至关重要.
