在Komagataella phaffii (Pichia pastoris) 中的一种自我诱导的异质蛋白表达系统

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 分子生物学分子生物学
• 工业微生物学 工业微生物学

背景情况:

• 科马加泰拉法菲 (Pichia pastoris) 是一种用于高水平异质蛋白质生产的关键酵母.
• 甲醇诱导性酒精氧化酶I促进剂 (P_AOX1) 被广泛使用,但由于甲醇的特性,它带来了安全性和可扩展性的挑战.

研究的目的:

• 为 K. phaffii. 开发一种新的,没有甲醇的蛋白质表达系统.
• 为了实现高效的异质蛋白表达,使用pectin作为诱导剂.

主要方法:

• 改造的重组K. phaffii细胞以构成性地表达pectinmethyl esterase.
• 使用P_AOX1促进剂来表达记者蛋白 (GFP,青).
• 在酵母培养基中加入素作为诱导剂.

主要成果:

• 在没有添加甲醇的情况下成功证明异质蛋白表达 (GFP,亚苏林).
• 新的自我诱导异质蛋白表达 (SILEX) 系统有效地与pectin.
• 该系统适合大规模生产,可适应各种蛋白质.

结论:

• 对于K. phaffii.来说,SILEX系统提供了一个更安全,更可扩展的替代方法,而不是以甲醇为基础的诱导.
• 素介导诱导为工业重组蛋白质生产提供了一个可行的策略.
• 这种没有甲醇的方法扩大了K. phaffii在生物技术和医学中的应用.