一个lentiviral工具包来监测气道上皮细胞分化使用生物发光

科学领域:

• 呼吸系统生物学 呼吸系统生物学
• 干细胞研究的研究.
• 皮质细胞分化的表皮细胞分化.

背景情况:

• 呼吸道基底细胞是呼吸道上皮层再生的关键成年干细胞.
• 目前研究气道上皮分化的方法缺乏动态和定量方法.
• 现有技术,如免疫组织化学和免疫光,提供有限的纵向数据.

研究的目的:

• 开发一种基于生物发光的新型报告系统,用于监测气道上皮细胞分化.
• 量化评估基底细胞,粘膜分泌细胞和长细胞的丰度.
• 为研究呼吸道上皮质再生 in vitro提供一个动态的工具.

主要方法:

• 主要的人类基底细胞被用lentiviral记者结构转化.
• 构造是由TP63 (基底细胞),MUC5AC (粘液分泌细胞) 和FOXJ1 (状细胞) 的促进体驱动的.
• 使用空气-液体界面和有机体培养中的生物发光来测量报告者基因活性.

主要成果:

• 晶状病毒结构成功监测了气道上皮质细胞的纵向分化.
• 记者基因表达与特定细胞系 (基底细胞,粘膜分泌细胞,状细胞) 相关联.
• 用IL-13和IL-6调节的记者活动来刺激,反映出预期的分化变化.

结论:

• 经过验证的lentiviral reporter构造提供了一种定量和动态的方法来研究气道上皮质分化.
• 该工具适用于原发性上皮细胞和诱导多能干细胞 (iPSC) 衍生培养.
• 能够对呼吸道疾病和再生医学进行先进的研究.