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Updated: Jun 17, 2025
11:31
Evaluation of the Storage Stability of Extracellular Vesicles
Published on: May 22, 2019
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冷保存和精液扩展剂对从公牛精液中分离出来的细胞外囊泡的影响
Emanuele Capra1, Roberto Frigerio2, Barbara Lazzari1
1Institute of Agricultural Biology and Biotechnology (IBBA), National Research Council (CNR), Lodi, Italy.
Frontiers in veterinary science
|August 14, 2024
概括
在冷保存的公牛精液中表征细胞外囊泡 (EVs) 对于生育预测至关重要. 虽然精液扩展器不会阻止spEV分析,但它们的存在和隔离方法可能会影响结果,因此需要对spEV和扩展器衍生的EV进行仔细评估.
科学领域:
- 生殖生物学 生殖生物学
- 细胞外囊泡 细胞外囊泡
- 冰冷保存技术 冰冷保存技术
背景情况:
- 精液冷保存对于牛人工授精和体外受精至关重要.
- 精子等离子体细胞外囊泡 (spEVs) 是精子功能的关键调节器和潜在的生育生物标志物.
- 精液扩展剂可能会干扰冷保存精液中spEVs的分子分析.
研究的目的:
- 在冷保存之前和之后,从精液等离子体中广泛描述EVs.
- 评估商业精液扩展剂对spEV隔离和分子分析的影响.
- 为了确定是否扩展器衍生的EVs阻碍使用spEVs作为牛的生育生物标志物.
主要方法:
- 从精子血 (有/没有扩展器) 和扩展器中分离出EV,使用超离心法 (UC) 和大小排除色谱法 (SEC).
- 描述包括物理分析 (大小,粒子数),为EV标记物进行西部涂抹 (CD9,Alix,TSG101),传输电子显微镜和miRNA分析.
- 差异表达分析 (Edge-R) 用于比较EV制剂之间的miRNA含量.
主要成果:
- 隔离方法影响了EV大小和粒子数量;扩展器EV比spEVs更丰富.
- 特定的EV标志物在spEV中得到证实,但不是在SiMoa.的扩展器衍生的囊泡中.
- 虽然在spEV制剂中检测到很小比例的扩展器miRNAs,但在扩展器存在时,spEV和扩展器EV都有11个差异表达的miRNAs.
结论:
- 精液扩展剂并不排除冷保存精液中spEVs的特征.
- 隔离方法和扩展器衍生的EVs可以影响spEVs的分子概况.
- 建议对spEV和扩展器EV进行表征,以准确评估生育生物标志物.
