通过高通量免疫磁珠分离,从布菲外套中分离人类外周血液单核细胞
Maria Villalva1, Sara Macphail1, Yingshi Li1
1New South Wales Health Statewide Biobank, New South Wales Health Pathology.
Journal of visualized experiments : JoVE
|August 14, 2024
概括
一种新的基于磁珠的方法为隔离外周血液单核细胞 (PBMCs) 提供了高通量替代方法. 这种技术提供了与传统密度梯度离心法相比较的细胞活力和种群分布,使得可扩展的研究应用成为可能.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 周围血液单核细胞 (PBMC) 对于免疫学研究至关重要.
- 传统的密度梯度离心法用于PBMC隔离是低通量和难以扩展的.
- 冷保存的PBMC为长期储存和各种下游应用提供了稳定的可行性.
研究的目的:
- 通过使用基于磁珠的方法,为PBMC隔离提供高通量工作流.
- 为了比较基于磁珠的隔离与密度梯度离心的效率和细胞质量.
- 评估采集后时间对PBMC产量和生存能力的影响.
主要方法:
- 开发和实施基于磁珠的PBMC隔离协议.
- 基于珠子和密度梯度方法之间的细胞度,活力和人口分布的比较.
- 在血液采集后的不同时间点评估PBMC可行性和产量.
主要成果:
- 基于磁珠的方法为密度梯度离心提供了一种高通量替代方法.
- 这两种分离技术之间的PBMC活力和细胞类型比例是可比的.
- 孤立的PBMC保持了70%以上的活力,长达9天,产量在5天后减半.
结论:
- 基于磁珠的隔离是一种可扩展和高效的方法来获得PBMC.
- 手动和自动的基于珠子的协议都提高了处理能力,并提供了预算灵活性.
- 这种方法支持各种下游应用,如流细胞计和基因组测序.
